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Application of locked nucleic acid-based probes in fluorescence in situ hybridization

Título
Application of locked nucleic acid-based probes in fluorescence in situ hybridization
Tipo
Artigo em Revista Científica Internacional
Ano
2016
Autores
Sílvia Fontenete
(Autor)
FEUP
Daniel Carvalho
(Autor)
Outra
A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. Sem AUTHENTICUS Sem ORCID
Nuno Guimarães
(Autor)
FEUP
Pedro Madureira
(Autor)
Outra
A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. Sem AUTHENTICUS Sem ORCID
Céu Figueiredo
(Autor)
FMUP
Jesper Wengel
(Autor)
Outra
A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. A pessoa não pertence à instituição. Sem AUTHENTICUS Sem ORCID
Nuno Filipe Azevedo
(Autor)
FEUP
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Revista
Vol. 100
Páginas: 5897-5906
ISSN: 0175-7598
Editora: Springer Nature
Outras Informações
ID Authenticus: P-00K-97R
Abstract (EN): Fluorescence in situ hybridization (FISH) employing nucleic acid mimics as probes is becoming an emerging molecular tool in the microbiology area for the detection and visualization of microorganisms. However, the impact that locked nucleic acid (LNA) and 2'-O-methyl (2'-OMe) RNA modifications have on the probe that is targeting microorganisms is unknown. In this study, the melting and hybridization efficiency properties of 18 different probes in regards to their use in FISH for the detection of the 16S rRNA of Helicobacter pylori were compared. For the same sequence and target, probe length and the type of nucleic acid mimics used as mixmers in LNA-based probes strongly influence the efficiency of detection. LNA probes with 10 to 15 mers showed the highest efficiency. Additionally, the combination of 2'-OMe RNA with LNA allowed an increase on the fluorescence intensities of the probes. Overall, these results have significant implications for the design and applications of LNA probes for the detection of microorganisms.
Idioma: Inglês
Tipo (Avaliação Docente): Científica
Nº de páginas: 10
Documentos
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